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透析袋原理介紹及使用方法步驟

更新時(shí)間:2019-02-18  |  點(diǎn)擊率:14759

自1861年發(fā)明透析方法至今已有一百多年。透析已成為生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室簡(jiǎn)便常用的分離純化技術(shù)之一。在生物大分子的制備過(guò)程中,除鹽、除少量有機(jī)溶劑、除去生物小分子雜質(zhì)和濃縮樣品等都要用到透析的技術(shù)。通常是將半透膜制成袋狀,將生物大分子樣品溶液置入袋內(nèi),將此透析袋浸入水或緩沖液中,樣品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋內(nèi)。

下面分別介紹透析袋和透析膜使用方法和步驟

透析袋使用前處理方法


1. 把透析袋剪成適當(dāng)長(zhǎng)度(10-20cm)的小段。
2. 在大體積的2%(W/V)碳酸氫鈉和 10mmol/L EDTA(pH8.0)中將透析袋煮沸10分鐘。
3. 用蒸餾水*清洗透析袋。
4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中將之煮沸10分鐘。
5.冷卻后,存放于4度,必須確保透析袋始終浸沒在溶液內(nèi)。從此時(shí)起取用透析袋是必須戴手套。 
6. 用前在透析袋內(nèi)裝滿水然后排出,將之清洗干凈。

透析膜使用前處理方法:

1. 戴手套把透析膜剪成適當(dāng)長(zhǎng)度,浸在蒸餾水中 15 min 泡軟。
2. 浸入 10 mM sodium bicarbonate 中,并加熱至 80℃,一邊攪拌至少 30min。
3. 換到 10 mM Na2ull;EDTA 中浸泡 30 min,以新鮮的 EDTA 同樣方法處理三次。
4. 再用 80℃ 蒸餾水洗 30 min,然后換到 20% 酒精中,放在 4℃冰箱中保存。

透析的動(dòng)力是擴(kuò)散壓,擴(kuò)散壓是由橫跨膜兩邊的濃度梯度形成的。透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶質(zhì)在膜內(nèi)外兩邊的濃度梯度,還正比于膜的面積和溫度,通常是4℃透析,升高溫度可加快透析速度。通常在試驗(yàn)前需要確定透析袋的截留分子量。

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